大多植物和動物組織含有葉酸(蝶酰谷氨酸、葉酸)，以還原甲基和甲酰多聚谷氨酸鹽形式存在。四氫葉酸鹽在轉運一碳單位(如在嘌呤和嘧啶核苷酸生物合成中)，氨基酸轉換(如組氨酸通過亞氨甲基谷氨酸而轉變成谷氨酸)以及甲酸鹽的產生和利用方面起輔酶作用。各種原因引起的葉酸利用障礙可導致貧血，稱為葉酸缺乏所致貧血。
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